Dijagnostička virusologija

Dijagnostička virusologija
Dijagnostička virusologija
Синоними	Laboratory diagnosis of viral infections
Сврха	laboratorijska dijagnostika virusnih infekcija

Dijagnostička virusologija (engl. Diagnostic Virusology) je skup metoda laboratorijske dijagnostike virusnih infekcija. Dijagnostička virologija je u 21. veku doživela čitav niz brzih promena usled pojave molekularnih tehnika i povećane kliničke osetljivosti seroloških ispitivanja.^[1]

Značaj

Dijagnostička virusologija je od izuzetnog značaj kod virusnih infekcija u nekim oblastima kliničke medicine, kod:

imunokompromitovanih pacijenta,
bolesnika sa transplantiranim oganima,
transplantacije koštane srži,
HIV pozitivnih pacijenta,
pacijente sa seksualno prenosivim bolestima,
akutnih respiratornih infekcija,
gastrointestinalnih infekcija (naročito kod male dece, ali i kod odraslih),
infekcija sličnim mononukleozi,
akutnih ili hroničnih virusnih hepatitisa,
teških infekcija oka,
kod novorođene dece i fetuse sa kongenitalnim infekcijama.^[1]

Dijagnostika virusološka takođe ima poseban značaj za javno zdravlje, jer uspešno, identifikuje uzročnika respiratornih infekcija i krucijalna je za prepoznavanje novih sojeva virusa influence i može inicirati program masovne imunizacije u slučaju pojave epidemije.^[2]

Metode

Od najpoznatijih metoda virusologije u kliničkoj laboratorisjkoj dijagnostici se primenjuju:

Vizuelizacija virusa elektronskim mikroskopom

Elektronska mikroskopija je složena, skupa, tehnički komplikovana metoda dijagnostike virusa, koja zahteva dobro obučen kadar, koji je samo jedan od nedostataka metode. U druge nedostke spadaju:

niska osetljivost (potrebno je > 106 virusnih čestica/ml ili gr uzorka),
virusi koji imaju iste morfološke karakteristike (oblik, veličinu i simetriju) odnosno pripadaju istoj familiji ne mogu se diferencirati elektronskom mikroskopijom.

Zato je ova metoda uglavnom ograničene upotrebe, koja se svodi na istraživačke laboratorije i centre.^[3]^[4]

Detekcija virusnih antigena

Detekcija virusnih antigena se zasniva na imunofluorescenciji, imunoenzimskim testovima (imunoperoksidaza, ELISA, aglutinacija). Najčešće se metodama detekcije virusnih antigena, koristi za njihovu identifikuju:^[1]

U uzorcima iz respiratornog trakta — identifikuju se: respiratorni sincicijalni virus (RSV), virus influence i parainfluence, adenovirusi

U uzorcima iz kožnih lezija — identifikuje se HSV i VZV

U uzorku stolice — identifikuje se rotavirus

U uzorcima krvi pacijenta — identifikuje se HSV i VZV i CMV i hepatitis B virus (površinski antigen)

Detekcija virusnog genoma

Detekcija virusnog genoma je molekularna tehnika koja se zasniva na PCR, drugim tehnikama amplifikacije nukleinskih kiselina, DNK ili RNK hibridizaciji i sekvenciranje nukleinskih kiselina

Detekcija virusnog genoma u novije vreme se pokazalae kao dobra metoda, kod virusnog genoma (DNK ili RNK) za:^[1]

otkrivanje novih virusa,
ispitivanje rezistencije virusa,
dizajniranje novih antivirusnih lekova,
dizajniranje vakcina.

Izolocija virusa (ćelijska kultura)

Izolacija virusa ili ćelijska kultura, može da bude iz:

embrionisanih jaja,
laboratorijske životinje.

Dokazivanje antivirusnih antitela u serumu (serologija)

Serologija se zasniva na:

testu neutralizacije,
testu inhibicije hemaglutinacije,
testu aglutinacije,
testu fiksacije komplementa,
ELISA,
imunofluorescenciji,
vestern blot tehnici.

Izolacija virusa u ćelijskoj kulturi, iako je vrlo senzitivna i specifična metoda, primenjuje se samo u bolje opremljenim laboratorijama jer zahteva specifičnu opremu i određeno iskustvo mikrobiologa.

Dijagnostička primena seroloških testova

Neki od primera dijagnostičke primene seroloških testova u virusologiji prikazan je u donjoj tabeli:^[5]

Dijagnostička primena seroloških tehnika
Test	Pimeri primene testa
Fiksacija komplementa	Detekcija antitela specifičnih za respiratorne viruse
ELISA	IgG/IgM antitela - rubela, morbili, mumps, HIV, hepatitis A Antigeni - HBs u serumu, norovirusa i rotavirusa u stoliici
Imunofluorescencija	IgG/IgM antitela - EBV,VZV Antigen – RSV, influenca i drugi respiratorni virusi u respiratornim sekretima
Aglutinacija	Antitela - rubela, toksoplazma Antigen - rotavirus, norovirus
Vestern blot i rekombinantni imunovezujući eseji	Potvrdni za HIV i HCV

Izvori

^ ^а ^б ^в ^г Nevena Arsenović-Ranin, Marina Milenković, Zorica Stojić-Vukanić (2010). „Imunološke i molekularne tehnike u laboratorijskoj dijagnostici virusnih infekcija”. Arh farm. 60: 1257.
^ Storch GA. Diagnostic Virology. In: Knipe DM, Howley PM. Fields Virology. (4th изд.). Lippincott Williams & Wilkins. 2001. стр. 493—531. Недостаје или је празан параметар |title= (помоћ).
^ Kudesia G, Wreghitt. Clinical and Diagnostic Virology. Cambridge University Press, 2009.
^ Murray PR, Witebsky FG. The Clinician and the Microbiology Laboratory. In: Mandell, Douglas and Bennett´s principles and practice of infectious diseases, eds. Gerald L. Mandell, John E. Bennett, Raphael Dolin. (7th изд.). Churchill Livingstone Elsevier. 2010. стр. 233—65. Недостаје или је празан параметар |title= (помоћ).
^ Nevena Arsenović-Ranin, Marina Milenković, Zorica Stojić-Vukanić (2010). „Imunološke i molekularne tehnike u laboratorijskoj dijagnostici virusnih infekcija”. Arh farm. 60: 1268.

Spoljašnje veze

Molimo Vas, obratite pažnju na važno upozorenje
u vezi sa temama iz oblasti medicine (zdravlja).

[1.-1] а ^б ^в ^г Nevena Arsenović-Ranin, Marina Milenković, Zorica Stojić-Vukanić (2010). „Imunološke i molekularne tehnike u laboratorijskoj dijagnostici virusnih infekcija”. Arh farm. 60: 1257.

[2] Storch GA. Diagnostic Virology. In: Knipe DM, Howley PM. Fields Virology. (4th изд.). Lippincott Williams & Wilkins. 2001. стр. 493—531. Недостаје или је празан параметар |title= (помоћ).

[3] Kudesia G, Wreghitt. Clinical and Diagnostic Virology. Cambridge University Press, 2009.

[4] Murray PR, Witebsky FG. The Clinician and the Microbiology Laboratory. In: Mandell, Douglas and Bennett´s principles and practice of infectious diseases, eds. Gerald L. Mandell, John E. Bennett, Raphael Dolin. (7th изд.). Churchill Livingstone Elsevier. 2010. стр. 233—65. Недостаје или је празан параметар |title= (помоћ).

[5] Nevena Arsenović-Ranin, Marina Milenković, Zorica Stojić-Vukanić (2010). „Imunološke i molekularne tehnike u laboratorijskoj dijagnostici virusnih infekcija”. Arh farm. 60: 1268.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]