Изотермална титрациона калориметрија
| Акроним | ИТЦ |
|---|---|
| Класификација | Термална анализа |
| Произвођачи | ТА Инструментс, Мицроцал/Малверн Инструментс |
| Друге технике | |
| Сродно | Изотермална микрокалориметрија Диференцијална скенирајућа калориметрија |
Изотермална титрациона калориметрија (ИТЦ) је физичка техника која се користи за одређивање термодинамичких параметара интеракција у раствору. Она се најчешће користи у студијама везивања малих молекула (као што су медицинска једињења) за велике макромолекуле (протеине, ДНК етц.).[1]
Термодинамичка мерења[уреди | уреди извор]
ИТЦ је квантитативна техника која може да одреди афинитет везивања (Ка), промене енталпије (ΔХ), и стехиометрију везивања (н) интеракције између два или више молекула у раствору. Из тих иницијалних мерења, се може одредити промена Гибсове енергије (ΔГ) и промена ентропије (ΔС) користећи релацију:
- ΔГ = -РТлнКа = ΔХ-ТΔС
(где је Р гасна константа, а Т је апсолутна температура).
Инструмент[уреди | уреди извор]
Изотермални титрациони калориметар се састоји од две идентичне ћелије које су направљене од високо топлотно проводног и хемијски интертног материјала, као што је Хејстелојева легура или злато, које су окружене адијабатским омотачем.[2] Сензитивна термоспрежна кола се користе за детекцију температурних разлика између референтне ћелије (напуњене пуфером или водом) и ћелије са узорком која садржи макромолекул. Пре додавања лиганда, константна снага (<1 мW) се примењује на референтну ћелију. Тиме се усмерава повратна спрега, активирајући грејач који је лоциран на челији са узорком.[3] Током експеримента, лиганд се титратрише у ћелију узорка у прецизним аликвотима, узрокујући било абсорпцију или ослобађање топлоте у зависности од природе реакције). Мерења се састоје од временски зависног уноса енергије неопходне да би одржала иста температура у обе ћелије.
Примена у развоју лекова[уреди | уреди извор]
ИТЦ је једна од техника које се корсте у карактеризацији афинитета везивања лиганда за протеине. Она се типично користи као техника за секундарно тестирање у високопроточном скринингу. ИТЦ је посебно корисна техника пошто она не даје само афинитет везивања, него и опис термодинамике везивања. Ова термодинамичка карактеризација омогућава даљу оптимизацију једињења.[4]
Види још[уреди | уреди извор]
- Изотермална микрокалориметрија
- Диференцијално сканирајућа калориметрија
- Површинска плазмонска резонанција
- Дуална поларизациона интерферометрија
Референце[уреди | уреди извор]
- ^ Пиерце, Мицхаел M.; Раман, C.С.; Налл, Баррy Т. (1999). „Исотхермал Титратион Цалориметрy оф Протеин–Протеин Интерацтионс”. Метходс. 19 (2): 213—221. ПМИД 10527727. дои:10.1006/метх.1999.0852.
- ^ О’Бриен, Р., Ладбурy, Ј.Е. анд Цхоwдрy Б.З. (2000) Исотхермал титратион цалориметрy оф биомолецулес. Цхаптер 10 ин Протеин-Лиганд интерацтионс: хyдродyнамицс анд цалориметрy Ед. Хардинг, С.Е. анд Цхоwдрy, Б.З, Оxфорд Университy Пресс. ISBN 0-19-963746-6
- ^ VP-ITC Instruction Manual (2001). Microcal Inc., Northampton, MA. http://www.microcalorimetry.com
- ^ Деспханде, Т.Исотхермал Титратион Цалориметрy (ИТЦ): Апплицатион ин Друг Дисцоверy
Спољашње везе[уреди | уреди извор]
- АФФИНИметер ис а софтwаре фор тхе аналyсис оф ИТЦ меасурементс. Ит инцлудес а фрее модел буилдер тоол тхат аллоwс десигнинг ан унлимитед вариетy оф Сеqуентиал Биндинг (цомпетитиве) модел инволвинг уп то тхрее дифферент цомпоундс.
- Алтернативе ИТЦ дата аналyсис софтwаре: ИЦ ИТЦ
- Сцриптед Утилитy фор Исотхермал Титратион Цалориметрy Аналyсис & Стоицхиометриц Еxаминатион: суИТЦасе
- Мицроцал/Малверн Инструментс